產(chǎn)品詳情
Celetrix電轉(zhuǎn)儀（細胞電穿孔儀）
1500A-EX電轉(zhuǎn)儀，最大轉(zhuǎn)染體積1000uL.
電轉(zhuǎn)染，最關心的是什么？
1.轉(zhuǎn)染效率
2.細胞死亡率
對一批同樣的細胞，性質(zhì)相似，為什么有的細胞順利轉(zhuǎn)入了 DNA, 有的細胞沒有得到DNA.，有的細胞電轉(zhuǎn)后活的好好的，有的就被‘電死’了。
從電轉(zhuǎn)儀的角度來講，
如果電轉(zhuǎn)染時候每個細胞受到的電壓相同，電擊時間相同，毫無疑問，通過調(diào)節(jié)電擊電壓，電擊時間，可以得到一個較高的轉(zhuǎn)染效率和較低的細胞死亡率。
問題是，傳統(tǒng)的電擊杯，宏觀上可以控制電轉(zhuǎn)儀每次電擊時間和電壓相同，但微觀上，電擊杯里面不同位置的細胞分到的電壓相同嗎。
答案是否定的。且將電擊杯里的小世界放大了分析。
1.電擊杯液面部分
電極杯內(nèi)由于液體表面張力的作用，液面不平，導致對液體內(nèi)部電壓分配的均勻度有很大的影響。電壓分配可以用一個簡化的等效電路來說明。電極杯內(nèi)液體可以分割成相同的部分，每個部分電阻相同多路先串聯(lián)再并聯(lián)，每一路兩端總電壓相等。
液面翹角處，相當于電阻先并聯(lián)后再串聯(lián)入電路，此處阻值變小，在電路中分壓變小（如右圖 ），細胞電壓不夠不能電轉(zhuǎn)。由于兩端總電壓相同，多出來的電壓分到液體凹面下方的區(qū)間，導致此處電壓過高（如右圖），細胞死亡。
結論：電極杯里靠近液面的部分細胞分配到的電壓相差較大。
2.靠近電極部分
電極杯中樣品與電極接觸面積大，電化學反應產(chǎn)生毒性物質(zhì)多，并且產(chǎn)生非常多的氣泡。氣泡對電轉(zhuǎn)的實際影響非常大。
由于氣泡是絕緣體，電流只能從氣泡之間的間隙溶液流過，這樣導致氣泡間隙的溶液中電流富集升高，處于其中的細胞因承受太高的電壓而死亡。氣泡作為一個球形絕緣體，可以扭曲周圍電流的走向。氣泡側(cè)面（氣泡間隙溶液）電流變大，而氣泡的前后兩方都是低電流區(qū)，處于此區(qū)的細胞得到電壓不夠，不能電轉(zhuǎn)。見右圖。
小結：
電極杯內(nèi)的溶液上方受到液面效應 影響，電場不均勻?？拷鼉蓚€電極1-2mm的區(qū)域由于氣泡的作用，電場也不均勻。電極杯內(nèi)電場比較均勻的較優(yōu)電轉(zhuǎn)區(qū)域很?。ㄓ覉D藍色部分），而1mm或者2mm電極杯甚至可能沒有較優(yōu)電轉(zhuǎn)區(qū)域。
Celetrix電轉(zhuǎn)儀如何避免以上問題
1.Celetrix工作時電轉(zhuǎn)管時密閉的，充滿了電轉(zhuǎn)液和電轉(zhuǎn)樣品，沒有液面效應
2.Celetrix工作時電轉(zhuǎn)管是加壓的，產(chǎn)生的氣體被壓縮溶于液體，而且相比于電擊杯，Celetrix工作時電轉(zhuǎn)管與液體接觸面積很小。幾乎避免了氣泡效應。
再加上Celetrix電轉(zhuǎn)儀本身獨特的設計（已經(jīng)獲得中國，美國，歐盟，日本等國家和地區(qū)的專利）。
Celetrix 電轉(zhuǎn)儀一次可以電轉(zhuǎn)從20uL到200uL不等的樣品，適應不同實驗需要。
Celetrix積累了多種血細胞，纖維細胞，上皮細胞，腎細胞，神經(jīng)細胞等電轉(zhuǎn)難易程度不一的各類細胞的優(yōu)化電轉(zhuǎn)參數(shù)，用戶只需根據(jù)我們的參數(shù)稍作實驗便可得到適合自己的參數(shù)。對于罕見的細胞類型，Celetrix實驗室可以協(xié)助用戶獲取最優(yōu)電轉(zhuǎn)參數(shù)。
Celetrix可以承諾同一實驗室的同一類細胞，可以做到同類產(chǎn)品中轉(zhuǎn)染率最高，細胞死亡率最低。
公司在上海備有樣機。
電轉(zhuǎn)舉例
1.T細胞的高效轉(zhuǎn)染
傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染方法對于T細胞非常困難，特別是對于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染。
Celetrix新一代電轉(zhuǎn)技術可以高效轉(zhuǎn)染從新鮮PBMC到刺激培養(yǎng)階段的T細胞。與其他電轉(zhuǎn)技術相比，Celetrix電轉(zhuǎn)技術具有最高的效率。同時，我們的技術也具有最高的細胞存活率，使得CAR-T，TCR-T制備、CRISPR介導的基因下調(diào)等變得容易。
所示圖片攝自長期培養(yǎng)的電轉(zhuǎn)后T細胞。T細胞在電轉(zhuǎn)后可以聚集生長，并且GFP表達可以維持很長時間。
2.Ipsc干細胞高效電轉(zhuǎn)
人類的iPSC電轉(zhuǎn)比較困難，一是達到高效率不容易，二是維持iPSC的未分化狀態(tài)不容易。
Celetrix新一代電轉(zhuǎn)技術可以用于電轉(zhuǎn)人的iPSC，比如ACS-1030（ATCC）。電轉(zhuǎn)效率保守估計可以達到73%以上，同時細胞存活率非常高，大部分細胞都存活很好。
ACS-1030 transfection with GFP plasmid after 24 hours
survival>85%
GFP%>73.7%
24h
電轉(zhuǎn)3天后，iPSC已經(jīng)自發(fā)形成團塊生長的典型未分化狀態(tài)，與未電轉(zhuǎn)的細胞看不出區(qū)別。同時，使用Celetrix電轉(zhuǎn)技術，營養(yǎng)細胞層也不是必須的，給實驗帶來了極大的方便。
72h
3.mRNA超高效電轉(zhuǎn)
有一些實驗方法需要轉(zhuǎn)染mRNA。Celetrix新一代電轉(zhuǎn)技術也可以電轉(zhuǎn)mRNA。
mRNA電轉(zhuǎn)的效率一般比質(zhì)粒高。比如GFP的mRNA電轉(zhuǎn)到Jurkat可以達到97.5%的超高效率。
mRNA表達的均勻度比質(zhì)粒要高，總體來說mRNA表達的蛋白在各個細胞中比較均衡。
mRNA的蛋白表達量一般不如強表達的質(zhì)粒，因此要達到較高的表達水平以及較長的表達持續(xù)時間，使用Celetrix的電轉(zhuǎn)技術就非常有必要。
siRNA電轉(zhuǎn)比mRNA更加容易。一般來說siRNA電轉(zhuǎn)本身可以達到接近100%的效率，但是蛋白水平的下調(diào)是由siRNA的性質(zhì)決定的。
